Precauciones para el autoclave

Precauciones para autoclave

Principio de esterilización en autoclave

El principio de la esterilización en autoclave es: en un vaporizador cerrado, el vapor no puede desbordarse y la presión continúa aumentando, de modo que el punto de ebullición del agua continúa aumentando, por lo que la temperatura en la olla también aumenta. Bajo una presión de 0.1MPa, la temperatura en la olla alcanza los 121°C. Bajo esta temperatura de vapor, puede matar rápidamente todo tipo de bacterias y su principio de alta resistencia al calor.

Precauciones:

Nota: Retire completamente el aire en la olla para que toda la olla esté al vapor y la esterilización esté completa. Hay varios métodos diferentes de esterilización en autoclave y ventilación, pero el propósito es purgar el aire, hacer que la temperatura de la olla se caliente uniformemente y asegurar una esterilización completa. El método común es: cierre la válvula de purga, después del encendido, cuando la presión suba a 0.05MPa, abra la válvula de purga para liberar aire y luego cierre la válvula de purga después de que el indicador del manómetro vuelva a cero. Después de cerrar la válvula y energizarla, cuando el manómetro suba a 0,1 MPa, comience a cronometrar y mantenga la presión entre 0,1 y 0,15 MPa durante 20 minutos.

 Después de alcanzar el tiempo de espera, se puede cortar la fuente de alimentación. Cuando la presión cae a 0,05 MPa, el vapor se puede liberar lentamente. Se debe tener cuidado de no reducir la presión demasiado rápido, lo que puede causar una intensa ebullición por descompresión y rebosar el líquido en el recipiente. Cuando la presión cae a cero, se puede abrir la tapa, se puede sacar el medio de cultivo y colocarlo en la plataforma para la condensación. No deje salir el aire durante mucho tiempo, lo que hará que cambie la composición del medio, de modo que el medio no se pueda inclinar. Una vez colocada durante demasiado tiempo, la tapa no se puede abrir debido a la presión negativa en la caldera. Siempre que la válvula de liberación de aire esté abierta, la presión atmosférica está dentro, las presiones interna y externa están equilibradas y la tapa es fácil de abrir.

 Para los elementos que no se deterioran después de la esterilización en autoclave, como agua esterilizada, medios de cultivo y equipos de inoculación, el tiempo de esterilización se puede extender o se puede aumentar la presión. El medio debe respetar estrictamente el tiempo de mantenimiento de la presión. Es necesario mantener la presión a fondo, pero también evitar que los ingredientes del medio se deterioren o reduzcan la eficacia. El tiempo no se puede extender a voluntad.

Steps:

1. First take out the inner sterilization barrel, and then add an appropriate amount of water to the outer pot to make the water surface level with the triangle shelf.

2. Put it back into the sterilization barrel and load the items to be sterilized. Be careful not to pack too much, so as not to hinder the flow of steam and affect the sterilization effect. Neither the Erlenmeyer flask nor the end of the test tube should be in contact with the wall of the barrel, so as to prevent the condensed water from drenching the wrapping paper and penetrating the cotton plug.

3. Cover and insert the exhaust hose on the cover into the exhaust slot of the inner sterilization barrel. Tighten the two opposite bolts at the same time in a two-by-two symmetrical manner, so that the tightening of the bolts is consistent and avoid air leakage.

4. Use an electric stove or gas to heat, and at the same time open the exhaust valve to make the water boil to remove the cold air in the pot. After the cold air is completely exhausted, close the exhaust valve and let the temperature in the pot gradually rise as the steam pressure increases. When the pressure in the pot rises to the required pressure, the heat source is controlled to maintain the pressure for the required time. This experiment uses 1.05kg/cm2, 121.3℃, 20 minutes sterilization.

5. When the time required for sterilization is up, cut off the power supply or turn off the gas, and let the temperature in the sterilization pot drop naturally. When the pressure of the pressure gauge drops to 0, open the exhaust valve, loosen the bolt, open the lid, and take out the sterilization article. If the pressure does not drop to 0, open the exhaust valve, and the pressure in the pot will suddenly drop, causing the culture medium in the container to rush out of the mouth of the flask or test tube due to the imbalance of the pressure inside and outside, causing the cotton plug to be contaminated with the culture medium. Pollution.

6. Put the removed sterile medium into a 37°C incubator for 24 hours. After inspection, if there is no bacteria growth, it can be used.